遺伝子断片エクソン(タンパク質合成をコードするゲノムの領域)のみを含む直線状の二本鎖DNA配列。 は、直線状の二本鎖DNA配列です。それらは、タンパク質発現のための直接アセンブリおよびクローニング、CRISPRを介したゲノム編集、抗体研究、および qPCRqPCRは「Quantitative polymerase chain reaction」の略(定量的ポリメラーゼ連鎖反応)で、PCRを用いてDNAを測定する技術です。 などのアプリケーションに使用できます。
Twist Bioscienceの遺伝子断片は、シリコンベースのDNA合成技術を使用して、一本鎖オリゴヌクレオチド (オリゴ) から合成されます (図 1)。この技術では、96ウェル プレートと同じフットプリントを持つシリコン チップを使用して、一度に100万個のオリゴシーケンスを生成します。各シリコンチップには数千個の個別のクラスターが含まれており、それぞれに固有のオリゴシーケンスを合成できる121の個別にアドレス指定可能な表面が含まれています (図 1bに挿入突然変異の一種で、DNAセグメントに1つ以上のヌクレオチドが付加されます。)。この技術により、Twist Bioscienceはお客様に、長さ300 ~ 1800 bpの二本鎖DNAフラグメント (表 1) を低エラー率で提供します。
表 1. 遺伝子断片の仕様 (Twist Bioscience、20231).
Gene fragment length | 300 – 1800 bp |
Order limit | No order limit |
Yield | 100 ng – 1 µg |
Error rate | 1 : 6000 nt |
Turnaround time | 5 business days |
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図 1. Twist Bioscience の遺伝子断片合成ワークフロー。シリコン チップは、b) の挿入図に示されています。ワークフローは 4 つの主なステップに分けることができます: (a) 目的の遺伝子の選択とその配列の設計、b) シリコンベースのプラットフォームでの一本鎖オリゴの化学合成、c) オリゴのアニーリングによる遺伝子フラグメントのアセンブリと生産PCR 増幅による二本鎖 DNADNAは 「deoxyribonucleic acid」の略で(デオキシリボ核酸)、2本のポリヌクレオチド鎖からなるポリマーで、互いに巻きついて二重らせんを形成しています。 More 断片の製造、および d) 顧客への直鎖状二本鎖 DNA 断片の出荷。エラー率を測定する必要がある場合は、ステップ d) の代わりに、ステップ e) ~ g) が行われます。 e) DNA断片をプラスミドにクローニングする。 f) 細胞へのプラスミドの形質転換、コロニーを成長させるための寒天プレートへのプレーティング、およびスクリーニングによる目的のコロニーの選択。 g) 配列決定および分析による、選択されたコロニーの配列の検証。
1Twist Bioscience. January 2023. Twist Gene Fragments. Twist Bioscience. https://www.twistbioscience.com/resources/product-sheet/gene-fragments